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尼康D3采用的是全画幅DX格式CMOS传感器，是尼康数码单反全系列的的旗舰机型。而采用FX格式传感器的D300则是尼康FX格式的旗舰机型。就像佳能的全画幅定位顶级高端专业、非全画幅的定位在准专业一样，尼康的FX格式定位专业领域，DX定位在准专业、摄影爱好者。对于尼康D300来说，专业顶级的身份售价万元出头，确实是不错的选择。
采用铝镁合金做为机身外壳是这类相机的标准配置，减轻了重量的同时也保障了机身的坚固性。在手柄处又包裹了类似的皮革，托在掌中手感绝佳。经过密封机身，具有一定程度的防尘防水。机身搭载的92万像素、3英寸的显示屏幕，可以实时取景。
D300采用尼康全新开发的DX格式（23.6×15.8mm）、1230万有效像素的CMOS，具备了自洁功能。搭载的是和D3一样的 EXPEED影像处理器，采用全新的51点自动对焦系统，除此之外还增加了动态区域对焦功能，其中包含了15个十字型对焦点。D300快门类型为电子操控纵走焦平面快门，快门的速度为30-1/8000秒，连拍速度可以达到8张/秒。
D300的大尺寸新型五棱镜取景器提供全幅100%的画面覆盖率；跟D3一样采用92万像素高分辨率，3.0英寸LCD显示屏，170°宽视角，支持LCD取景。感光度方面，D300感光范围是ISO 200 - 3200, 以 1/3、1/2或1EV 步长调整, 低于ISO200时，可以进行约为0.3、0.5、0.7或1EV（相当于ISO100）的调节；高于ISO3200时，可以进行约0.3、0.5、0.7和1EV（相当于ISO6400）的调节。
D300是F卡口，可以搭配尼克尔AF、DX镜头。D300支持CF卡扩展，使用EN-EL3e锂电池供电。
